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凝膠電泳

凝膠電泳是根據(jù)大小和電荷分離和分析大分子(DNA,RNA和蛋白質(zhì))及其片段的方法。它用于臨床化學(xué)中通過電荷和/或大小分離蛋白質(zhì)(IEF瓊脂糖,基本上不依賴于大小)以及在生物化學(xué)和分子生物學(xué)中按照長度分離DNA和RNA片段的混合群體,以估計(jì)DNA和RNA的大小片段或通過電荷分離蛋白質(zhì)。
 
通過施加電場將核酸分子分開,以將帶負(fù)電的分子移動(dòng)通過瓊脂糖或其他物質(zhì)的基質(zhì)。較短的分子移動(dòng)得更快并且移動(dòng)得更遠(yuǎn),因?yàn)楦痰姆肿痈菀淄ㄟ^凝膠的孔隙遷移。這種現(xiàn)象被稱為篩分。蛋白質(zhì)在瓊脂糖中被電荷分離,因?yàn)槟z的孔隙太大而無法篩選蛋白質(zhì)。凝膠電泳也可以用于分離納米顆粒。
 
凝膠電泳在電泳期間使用凝膠作為抗凸起介質(zhì)和/或篩分介質(zhì),帶電粒子在電場中移動(dòng)。凝膠可以抑制由于電場作用而引起的熱對流,也可以作為篩分介質(zhì),阻止分子通過; 凝膠也可以簡單地用于維持完成的分離,從而可以應(yīng)用后電泳染色。DNA凝膠電泳通常用于分析目的,通常在通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增DNA之后進(jìn)行,但也可以在使用其他方法如質(zhì)譜法,RFLP,PCR,克隆法、DNA測序法或Southern雜交法進(jìn)行進(jìn)一步鑒定之前,可作為一種制備技術(shù)。
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