在樣品加入上樣緩沖液中含有甘油或蔗糖以增加密度，使樣品沉入孔底；上樣緩沖液中一般還含有兩種指示劑，溴酚蘭和二甲苯菁，用于指示樣呂的遷移過程。上樣緩沖液儲存液一般為6倍（10倍），表示其濃度為工作濃度的六倍。使用時上樣緩沖液應稀釋到一倍濃度。點樣方法是將移液槍基本垂直對準點樣孔，用另一只手幫助固定移液槍下端，移液槍的槍頭**進入點樣孔即可將樣品注入孔內。上樣量的多少根據跑膠的目的而不同，一般直接跑DNA時量**少，跑一般的分子標記適中，回收時可以都加進去。**后根據擴增條帶的大小點上適合的DNA Maker。 3、電泳 

將電泳儀的正極與電泳槽的正極相連，負極與負極相連，每次電泳時都要檢查一下電極方向，以免白干（新手來做時可能就有這樣的情況發生）。核酸帶負電荷，從負極向正極移動。電泳槽中電泳緩沖液與制膠用電泳緩沖液應相同，電泳緩沖液剛好浸過膠為好。電泳緩沖液濃度太大則電流加大，凝膠發熱，易使DNA降解。電泳早所加電壓一般不超過5v/cm（正負電極之間的距離，而不是凝膠的長度）。電泳時間一般為30-60min，根據實驗需要也可作適當調整。電壓增高，電泳時間縮短，核酸條帶相對來說不夠整齊，不夠清晰；相反，電壓降低，電泳時間較長，條帶會相對的清晰。另外，如果電泳后樣品泳支很慢或者沒移動可能是由于擋板沒有拿開。  

附 EB作用原理：觀察瓊脂糖凝膠中DNA**常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進行染色，溴化乙錠含有一個可以嵌入DNA堆積堿基之間的一個三環平面基團。它與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中，大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入后，其平面基團與螺旋的軸線垂直并通過范德華力與上下堿基相互作用。這個基團的固定位置及其與堿基的密切接近，導致與DNA結合的染料呈現熒光，其熒光產率比游離溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料，而被結合的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。這兩種情況下，被吸收的能量在可見光譜紅橙區的590nm處重新發射出來。由于溴化乙錠-DNA復合物的熒光產率比沒有結合DNA的染料高出20-30倍，所以當凝膠中含有游離的溴化乙錠（0.5ug/ml）時，可以檢測到少**10ng的NDA條帶。